1978 में पहली दवा के जन्म के बाद से ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवाओं का विकास 40 से अधिक वर्षों से किया जा रहा है। हालांकि, उनकी अंतर्निहित अस्थिरता और कम सेलुलर अवशोषण दक्षता के कारण उनका विकास अन्य प्रकार की दवाओं की तुलना में धीमा रहा है। नई वितरण प्रणालियों और रासायनिक संशोधन तकनीकों के उद्भव ने इन समस्याओं में काफी सुधार किया है, और ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवाओं ने हाल के वर्षों में तेजी से विकास दिखाया है। वर्तमान में, एंटीबॉडी दवाओं और अन्य बायोलॉजिक्स के इम्युनोजेनेसिटी मूल्यांकन पर पहले से ही दिशानिर्देश और उद्योग श्वेत पत्र हैं, लेकिन जानवरों या रोगियों में ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवाओं की इम्युनोजेनेसिटी पर अभी भी कुछ रिपोर्टें हैं, और कोई व्यवस्थित मार्गदर्शन नहीं है। ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवाओं की इम्युनोजेनेसिटी की सीमित समझ भी दवाओं के इस वर्ग के विकास को काफी हद तक प्रतिबंधित करती है।
दवा की इम्युनोजेनेसिटी की कुंजी इस बात पर विचार करना है कि क्या प्रतिरक्षा प्रणाली दवा को स्वयं के रूप में पहचान सकती है और इसे सहन कर सकती है, और इम्युनोजेनेसिटी को प्रभावित करने वाले अन्य पहलुओं में प्रशासन का मार्ग और इलाज की जाने वाली विशिष्ट बीमारी शामिल है (चित्र 1)।
चित्र 1 इम्युनोजेनेसिटी को प्रभावित करने के तरीके (फ्रंट. इम्यूनोल., 18 अगस्त 2020 सेक. टीके और आणविक चिकित्सा विज्ञान)
दवा की विशेषताएं: अधिकांश विशिष्ट बायोलॉजिक्स (जैसे मोनोक्लोनल एंटीबॉडी) की तुलना में, ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवाएं अपेक्षाकृत छोटी होती हैं, जिनमें बड़े प्रोटीन समकक्षों की तुलना में कम संभावित एपिटोप होते हैं, इसलिए उन्हें आमतौर पर कम इम्यूनोजेनेसिटी वाला माना जाता है। हालाँकि, ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड अणुओं और प्रतिरक्षा प्रणाली के बीच की बातचीत जटिल है, जिसमें जन्मजात प्रतिरक्षा को प्रेरित करने की क्षमता होती है। पिछले अध्ययनों से पता चला है कि siRNA अनुक्रम रिसेप्टर्स (TLRs) जैसे टोल के माध्यम से प्रतिरक्षा उत्तेजना को प्रभावित कर सकते हैं, और ग्वानिन और यूरैसिल बेस से समृद्ध siRNA अनुक्रम अधिक प्रतिरक्षा उत्तेजक गतिविधि उत्पन्न करते हैं। ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवाओं की स्थिरता, सुरक्षा, सेलुलर अवशोषण और प्रभावकारिता में सुधार करने के लिए, नई पीढ़ी के ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवाओं की विकास प्रक्रिया में आमतौर पर रासायनिक संशोधन लागू किए जाते हैं। न्यूक्लिक एसिड बैकबोन, राइबोस के ग्लाइकोसिल भाग और न्यूक्लियोबेस के संशोधनों का व्यापक रूप से उपयोग किया गया है, और इन संशोधनों से प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया में वृद्धि होने की संभावना है। इसके अलावा, सूक्ष्मजीवों के समान न्यूक्लिक एसिड अनुक्रमों में भी प्रतिरक्षा उत्तेजक क्षमता हो सकती है, इसलिए नए ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों में उच्च इम्युनोजेनेसिटी हो सकती है।
प्रशासन का मार्ग: ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवाएं प्रशासन के विभिन्न मार्गों के माध्यम से कार्य कर सकती हैं, जैसे अंतःशिरा और ऊतक इंजेक्शन, मौखिक और चमड़े के नीचे इंजेक्शन (चित्रा 2)।
चित्र 2 ओलिगोन्यूक्लियोटाइड दवा प्रशासन और वितरण विधियों के मार्ग (नेट नैनोटेक्नोल . 16, 630-643 (2021)।)
वर्तमान में, स्वीकृत ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवाएं मुख्य रूप से प्रतिरक्षा {{0}सीमित साइटों तक पहुंचाने का काम करती हैं, लेकिन ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवाओं को विभिन्न ऊतकों तक प्रभावी ढंग से पहुंचाना अभी भी ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवा के विकास के लिए एक बड़ी चुनौती है, क्योंकि ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स को झिल्ली से गुजरने में कठिनाई होती है। डिलीवरी वाहकों के विकास ने इस समस्या को काफी हद तक हल कर दिया है, और डिलीवरी वाहक प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाएं ला सकते हैं जो परिमाण के दो क्रमों से भिन्न होती हैं और विभिन्न तंत्रों के माध्यम से कार्य कर सकती हैं। विभिन्न वितरण वाहक अनूठे तरीकों से कोशिका झिल्लियों में siRNA अणुओं को वितरित करते हैं (चित्र 2), siRNA को अलग-अलग मात्रा और प्रकार के पैटर्न पहचान रिसेप्टर्स (PRRs) के संपर्क में लाते हैं, जिससे वे जन्मजात प्रतिरक्षा पहचान के प्रति अधिक संवेदनशील हो जाते हैं। इसके अलावा, गैलएनएसी (एन-एसिटिलेटेड गैलेक्टोसामाइन) संयुग्मन और लिपिड नैनोपार्टिकल (एलएनपी) वाहक की वर्तमान सामान्य वितरण विधियां मुख्य रूप से अंतःशिरा और चमड़े के नीचे इंजेक्शन हैं, जिनमें इम्युनोजेनेसिटी का खतरा अधिक होता है। हाल के वर्षों में, नई ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवा वितरण विधियां जैसे अंतर्जात वेसिकल्स, गोलाकार न्यूक्लिक एसिड और नैनो टेक्नोलॉजी अनुप्रयोग भी आगे बढ़ रहे हैं, जो इम्यूनोजेनेसिटी परीक्षण में नई चुनौतियां भी लाएंगे।
ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवाओं की इम्यूनोजेनेसिटी के लिए विश्लेषण रणनीति
यह ध्यान में रखते हुए कि इम्युनोजेनेसिटी दवाओं की प्रभावकारिता और सुरक्षा से अत्यधिक संबंधित है, ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवाओं के विकास और नैदानिक परीक्षणों का समर्थन करने के लिए इम्युनोजेनेसिटी विश्लेषण की आवश्यकता है। प्रोटीन दवाओं पर लागू होने वाले कई जैवविश्लेषणात्मक सिद्धांत ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवाओं पर भी लागू होते हैं, जो मुख्य रूप से एक पदानुक्रमित इम्यूनोजेनेसिटी विश्लेषण रणनीति का पालन करते हैं, लेकिन हमें ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवाओं के अद्वितीय संरचनात्मक घटकों, प्रशासन के मार्गों और कार्रवाई के स्थानों पर भी विचार करने की आवश्यकता है जो प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं और बायोएनालिटिकल तरीकों की जटिलता को बढ़ाते हैं।
ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवाओं की विशेषताओं के आधार पर, उनकी इम्युनोजेनेसिटी का परीक्षण करते समय कुछ ध्यान दिया जाना चाहिए: 1)एंटी{0}}ड्रग एंटीबॉडीज (एडीए)दवा संशोधन घटकों, वितरण पदार्थों और वितरण मीडिया द्वारा उत्पादित किया जा सकता है जिसका पूरी तरह से मूल्यांकन करने की आवश्यकता है; 2) ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवाओं के प्रशासन के विभिन्न मार्ग हैं, हमें विभिन्न प्रकार के नमूनों में विभिन्न प्रकार के इम्युनोग्लोबुलिन एंटीबॉडी का पता लगाने पर ध्यान देने की आवश्यकता है; 3) वर्तमान ज्ञान के अनुसार, पारंपरिक दवाओं की तुलना में, ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड दवाओं से प्रेरित एडीए प्रतिक्रिया कभी-कभी धीरे-धीरे विकसित होती है, संभवतः कई महीनों तक। इसलिए, विकास के प्रारंभिक चरण में इम्युनोजेनेसिटी जोखिम मूल्यांकन करते समय, इस चरण में नमूनों को बचाने और क्लिनिक में सामने आए नए डेटा के आधार पर उनकी इम्युनोजेनेसिटी की जांच करने, बाद के और प्रमुख अध्ययनों के लिए जानकारी प्रदान करने की सिफारिश की जाती है।
siRNA दवाओं के विकास और नैदानिक परीक्षणों का समर्थन करने के लिए, फार्मारॉन ने siRNA द्वारा उत्पादित एडीए के लिए एक पहचान विधि विकसित की है, और विधि स्थापना की प्रक्रिया में कुछ विचार और सुझाव दिए हैं:
प्रोटीन एंटीबॉडी से भिन्न संरचना के कारण, पारंपरिक प्रोटीन लेबलिंग विधियां siRNA दवा लेबलिंग पर लागू नहीं होती हैं, और बायोटिन और डिगॉक्सिन के संयोजन वाली एक नई लेबलिंग विधि सफलतापूर्वक लागू की गई है;
siRNA की कमजोर इम्युनोजेनेसिटी के कारण, तैयार सकारात्मक नियंत्रण एंटीबॉडी की आत्मीयता खराब है। पता लगाने के चरणों को लगातार अनुकूलित करके, विधि संवेदनशीलता ने वर्तमान नियामक आवश्यकताओं को पूरा किया है।
