मस्तिष्कमेरु द्रव (सीएसएफ) विश्लेषण केंद्रीय तंत्रिका तंत्र के भीतर होने वाली विभिन्न प्रक्रियाओं, जैसे रक्तस्राव, सूजन, संक्रमण, ट्यूमर और अन्य नैदानिक स्थितियों का पता लगाने के लिए एक शक्तिशाली उपकरण है। इसके अतिरिक्त, सीएसएफ (जैसे हार्मोन, ड्रग्स, न्यूरोट्रांसमीटर, बायोमार्कर, मेटाबोलाइट्स और वायरस) में यौगिकों का क्रमिक मूल्यांकन बुनियादी और अनुवादात्मक अनुसंधान दोनों में समान रूप से महत्वपूर्ण है। केंद्रीय तंत्रिका तंत्र में सीएसएफ की मात्रा स्राव और अवशोषण के माध्यम से स्थिर बनी रहती है।
I.परिचालन संबंधी विचार
सीएसएफ आमतौर पर सेरेब्रल वेंट्रिकल या काठ पंचर के माध्यम से एकत्र किया जाता है। काठ का पंचर गैर-मानव प्राइमेट्स में जटिलताओं का अपेक्षाकृत कम जोखिम रखता है क्योंकि, अधिकांश प्रजातियों में, काठ का पंचर स्थल रीढ़ की हड्डी के अंत से दूर होता है। उचित एनेस्थीसिया और सड़न रोकने वाली तकनीक, जिसमें शेविंग जैसी साइट की तैयारी और बाँझ सामग्री का उपयोग शामिल है, आवश्यक हैं। बाँझ सर्जिकल पर्दे पर विचार करते हुए, कम से कम बाँझ दस्ताने, सीरिंज और सुइयों का उपयोग किया जाना चाहिए। सीएसएफ संग्रह आमतौर पर पार्श्व लेटने, स्टर्नल लेटने या बैठने की स्थिति में किया जाता है, सेरेब्रल वेंट्रिकल तक पहुंच में सुधार होता है या गर्दन या रीढ़ की हड्डी के लचीलेपन के माध्यम से इंटरवर्टेब्रल स्पेस को बढ़ाया जाता है। चुनी गई सुई का आकार और लंबाई गैर-मानव प्राइमेट्स की प्रजातियों और आकार के लिए उपयुक्त होनी चाहिए। प्रक्रिया के दौरान उपयोग की जाने वाली तकनीकें, उपकरण, उपभोग्य वस्तुएं और पेरिऑपरेटिव देखभाल प्रजातियों, अनुसंधान उद्देश्यों और नैदानिक पशुचिकित्सक प्राथमिकताओं के आधार पर भिन्न होती हैं।
कुछ अनुसंधान प्रोटोकॉल के लिए समय के साथ सीएसएफ के निरंतर संग्रह या असंवेदनशील विषयों से सीएसएफ नमूनों के संग्रह की आवश्यकता हो सकती है। इन प्रोटोकॉल के लिए, जागृत रीसस बंदरों से निरंतर सीएसएफ संग्रह चमड़े के नीचे के संग्रह बंदरगाहों से जुड़े दीर्घकालिक प्रत्यारोपित सीएसएफ कैथेटर के माध्यम से प्राप्त किया जा सकता है।
लेखक ने कुल सीएसएफ मात्रा, ड्यूरल पंचर के लिए सीमा या सिफारिशों, संग्रह आवृत्ति, सुरक्षित निकासी मात्रा और सीएसएफ पुनःपूर्ति दर के संबंध में नवीनतम संदर्भ खोजने का हर संभव प्रयास किया है। इस पहलू पर साहित्य अधिकांश गैर-मानव प्राइमेट्स के लिए सीमित है। इसके अतिरिक्त, संग्रह के तरीके अलग-अलग होते हैं, क्योंकि नॉन -ह्यूमन प्राइमेट वेटरनरी एसोसिएशन के सदस्यों के सर्वेक्षण से संकेत मिलता है कि विभिन्न संस्थान सीएसएफ संग्रह के लिए विभिन्न तरीकों का सफलतापूर्वक उपयोग करते हैं। इसलिए, लेखक मौजूदा सर्वोत्तम साक्ष्यों के आधार पर सीएसएफ संग्रह के लिए विचार और सिफारिशें प्रदान करता है।
संदर्भ के लिए, पिछले अध्ययनों ने निर्धारित किया है कि वयस्क नर रीसस बंदरों (8.0-10.6 किग्रा) में स्पष्ट सीएसएफ मात्रा 10+/-0.06 एमएल है, सीएसएफ प्रवाह दर 0.018+/-0.003 एमएल/मिनट के साथ। रीसस बंदरों में सीएसएफ गठन दर 28.6-44.2 μL/मिनट तक होती है। अधिक शिक्षाप्रद सिफ़ारिशों के विकास को सुविधाजनक बनाने के लिए इस क्षेत्र में गैर-मानव प्राइमेट्स पर और अधिक शोध की आवश्यकता है।
द्वितीय. संभावित प्रतिकूल प्रतिक्रियाएँ
यद्यपि गैर-मानव प्राइमेट्स में सीएसएफ संग्रह के दौरान जटिलताएं दुर्लभ हैं, शारीरिक भिन्नताएं और अनुचित या अपर्याप्त तकनीकी तरीकों से नमूना क्षति या रक्तस्राव, हर्नियेशन, संक्रमण, मस्तिष्क स्टेम, रीढ़ की हड्डी, या तंत्रिका जड़ों को नुकसान और जानवरों की परेशानी जैसी जटिलताएं हो सकती हैं। हालाँकि ये जटिलताएँ दुर्लभ हैं, फिर भी ये पशु कल्याण से समझौता कर सकती हैं।
इसमें शामिल जोखिमों के कारण, सीएसएफ को पशुचिकित्सक या प्रशिक्षित पशुचिकित्सा कर्मियों द्वारा एकत्र किया जाना चाहिए। सीएसएफ संग्रह के असफल प्रयासों के लिए, प्रथाएँ भिन्न हो सकती हैं। एक व्यक्ति द्वारा अधिकतम तीन असफल प्रयासों की अनुमति देना आम बात है। तीसरे असफल प्रयास के बाद, किसी अन्य योग्य व्यक्ति को कार्यभार संभालना चाहिए। यदि दूसरा व्यक्ति तीन प्रयासों के बाद सीएसएफ एकत्र करने में असमर्थ है, तो प्रयासों को रोक दिया जाना चाहिए। इस बीच, जानवर को उचित एनाल्जेसिक उपचार मिलेगा और वह एनेस्थीसिया से उबर जाएगा। असफल प्रयासों के बाद संग्रह स्थल (उदाहरण के लिए, सेरेब्रल वेंट्रिकल्स से काठ तक) बदलने से अक्सर सफलता मिलती है। यदि इमेजिंग मार्गदर्शन के बिना कोई असफल प्रयास होता है, तो फ़्लुओरोस्कोपी {{9}सहायक सुई प्लेसमेंट का उपयोग किया जा सकता है। सफलता दर बढ़ाने के अलावा, छवि मार्गदर्शन दर्दनाक पंचर की दर को भी कम कर सकता है।
ऑपरेशन के बाद की निगरानी तब तक जारी रखनी चाहिए जब तक कि जानवर अपने पिंजरे में वापस न आ जाए और बिना सहारे के सीधी मुद्रा बनाए रख सके। जानवरों की निगरानी कम से कम 24 घंटे तक या संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति (IACUC) द्वारा अनुमोदित प्रोटोकॉल के अनुसार होनी चाहिए। निगरानी में बुनियादी शारीरिक, व्यवहारिक और लोकोमोटर मापदंडों का आकलन शामिल होना चाहिए। न्यूरोलॉजिकल डिसफंक्शन के लक्षण, जिनमें सुस्ती, अवसाद, कोमा और सिर दबाने के लक्षण शामिल हैं, लेकिन इन्हीं तक सीमित नहीं हैं, का विशेष रूप से मूल्यांकन किया जाना चाहिए। सीएसएफ संग्रह के बाद सिरदर्द और परिणामी इंट्राक्रैनियल हाइपोटेंशन मानव चिकित्सा में असामान्य नहीं हैं। गैर-मानव प्राइमेट्स में इस संभावित जटिलता को ध्यान में रखते हुए, सर्जरी के दौरान एनाल्जेसिक उपचार प्रदान किया जाना चाहिए और सर्जरी के बाद 2-3 दिनों तक जारी रखा जाना चाहिए, या सिरदर्द या रीढ़ की हड्डी में दर्द से जुड़े व्यवहार से संबंधित पोस्टऑपरेटिव टिप्पणियों के आधार पर आवश्यकतानुसार। सबसे प्रभावी एनाल्जेसिक आहार में ऑपरेशन से पहले शुरू किया गया व्यापक उपचार शामिल हो सकता है।
तृतीय. IACUC विचार और रिकॉर्ड रखना
IACUC को CSF संग्रहण से संबंधित प्रक्रियाओं और सभी संभावित जटिलताओं से परिचित होना चाहिए और कम से कम सालाना उनकी समीक्षा करनी चाहिए। सभी प्रासंगिक जानकारी, जैसे कि दवा की खुराक, ऑपरेशन से पहले की तैयारी, एकत्र की गई सीएसएफ की मात्रा, संग्रह की आवृत्ति, और अल्पकालिक और दीर्घकालिक पोस्टऑपरेटिव रिकवरी, को आईएसीयूसी प्रोटोकॉल में वर्णित किया जाना चाहिए और मेडिकल रिकॉर्ड या प्रयोगशाला लॉग में उचित रूप से दर्ज किया जाना चाहिए।
जबकि सीएसएफ अनुसंधान प्रोटोकॉल में महत्वपूर्ण डेटा हो सकता है, अनुचित संग्रह तकनीक पशु कल्याण को प्रभावित कर सकती है। प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते समय, संग्रह की संख्या और आवृत्ति के लिए वैज्ञानिक औचित्य प्रदान किया जाना चाहिए। विशेष रूप से, IACUC को CSF संग्रह से जुड़े प्रत्येक प्रस्ताव का सावधानीपूर्वक मूल्यांकन करना चाहिए और निम्नलिखित पर विचार करना चाहिए:
1.क्या प्रोटोकॉल में उल्लिखित वैज्ञानिक उद्देश्यों को प्राप्त करने के लिए सीएसएफ संग्रह आवश्यक है?
2.क्या वैकल्पिक तरीके और कम आक्रामक केंद्रीय तंत्रिका तंत्र मूल्यांकन विधियां (जैसे इमेजिंग तकनीक) उपलब्ध हैं, और यदि हां, तो क्या उन पर विचार किया गया है?
3.क्या ऑपरेटरों ने उचित प्रशिक्षण प्राप्त किया है और उनके पास पर्याप्त कौशल हैं?
4.क्या उचित पेरिऑपरेटिव एनेस्थीसिया और एनाल्जेसिक आहार उपलब्ध कराया जाएगा? एनेस्थीसिया और एनाल्जेसिक योजनाओं के संबंध में प्रयोगशाला पशु पशु चिकित्सकों से परामर्श लिया जाना चाहिए।
5.क्या एकत्रित सीएसएफ मात्रा जानवर की उम्र और आकार पर विचार करती है?
6.क्या ड्यूरल पंचर की संख्या और आवृत्ति जानवर के लिए उपयुक्त है, और क्या जटिलताओं का जोखिम कम हो गया है? यदि एकाधिक सीएसएफ संग्रह अध्ययन का हिस्सा हैं, तो प्रत्येक जानवर के लिए अधिकतम संग्रह समय निर्दिष्ट किया जाना चाहिए।
7.क्या पोस्टऑपरेटिव निगरानी योजना उपयुक्त है?
8.क्या सभी संभावित पोस्टऑपरेटिव जटिलताओं पर विचार किया गया है, और क्या इच्छामृत्यु सहित सभी उचित हस्तक्षेपों को सूचीबद्ध किया गया है?
